在畜牧业、水产养殖业长期大量不合理使用抗菌药物，会导致药物残留、细菌耐药性等问题，严重影响畜牧、水产品的安全质量。此外，抗生素可通过生物富集或水体等途径进人人体，影响人类的健康安全。我国从2015年提出停止使用洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星等四种喹诺酮类抗菌药物到2020年饲料中全面禁抗，如何保障畜禽肠道健康成为业内关注的焦点问题，人们不断探索酸化剂、益生元、益生菌、植物提取物以及中草药替代抗菌药物的可行性。乳酸菌是广泛存在于动物肠道中具有重要生理功能的菌群，给动物饲喂乳酸菌制剂，能够调节肠道菌群平衡，改善肠道健康，提高机体免疫力，发挥抗菌作用，提高饲料利用率和动物生产性能。发现，给肉鸡的饮水中加人植物乳杆菌可显著提高肉鸡血液IgG和新城疫免疫抗体水平。研究表明，给肉鸡的饮水中加人植物乳杆菌可显著提高肉鸡血液IgA水平。研究表明，在饲料中添加植物乳杆菌可提高肉鸡血液IgA、IgG、IFN-y、IL-2和IL-6水平。给雏鸡灌服植物乳杆菌液可显著提高雏鸡血液中新城疫免疫抗体效价。体外细胞试验证明，植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌具有较强的清除自由基的能力，且植物乳杆菌优于嗜酸乳杆菌。通过体外试验发现，植物乳杆菌IBM1具有较强的抗氧化能力。植物乳杆菌代谢产物能显著提高肉仔鸡血清中SOD和GSH-Px的活性。前期研究发现，植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌发酵饲料以15%比例替换蛋鸡配合饲料，可显著提高蛋鸡的产蛋率，降低料蛋比，提高经济效益，但其作用机制尚不明确。本试验旨在研究植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌发酵饲料对蛋鸡血液抗氧化指标及疫苗免疫抗体水平以、主要脏器指数的影响，为乳酸菌发酵饲料在蛋鸡生产中应用提供理论依据。

1.1试验材料

1.1.1乳酸菌发酵原液

乳酸菌发酵原液，主要由植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌等乳酸菌混合培养而成，有效微生物20亿/mL，阴凉避光处保存，保质期12个月。

1.1.2试剂盒

禽流感H9N1抗体(AIV-H9N 1Ab)检测试剂盒、鸡新城疫抗体(NDV Ah)检测试剂盒购自上海劲马科技生物有限公司；超氧化物歧化酶（SOD）测试盒(WST-1法)、丙二醛(MDA )测定试剂盒(TBA法)、谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px )、总抗氧化能力(T-AOC)测试盒购自南京建成生物工程研究所。

1.1.3仪器设备 

MK3酶标仪；UV-2600i紫外可见光分光光度计。

1.2试验动物与处理

选取288只37周龄健康的海兰蛋鸡，随机分为4组，每组设6个重复，每重复12羽蛋鸡。第1组为对照组，饲喂基础日粮(表1)；第2、3、4组为试验组，分别饲喂含5%乳酸菌发酵饲料+95%基础日粮、10%乳酸菌发酵饲料+90%基础日粮和15%乳酸菌发酵饲料+85%基础日粮的混合日粮。预试期7天，试验期60天。

2.1乳酸菌发酵饲料对蛋鸡血桨抗氧化能力的影响

试验至30天，第4组蛋鸡血浆T-AOC显著高于对照组，SOD活性极显著高于对照组及第2组(P<0.01)；MDA的含量极显著低于对照组(P<0.01)。第3、4组GSH-Px含量显著高于对照组(P<0.01)。

试验至60天，第4组蛋鸡血浆T-AOC显著高于对照组和第2组(P<0.05)，第4组蛋鸡血浆SOD活性极显著高于对照(P<0.01)，第2、3组蛋鸡血浆SOD活性显著高于对照组(P<0.05)，试验组蛋鸡血浆MDA的含量极显著低于对照组(P<0.01)，第4组显著低于第2组(P<0.05)。第3、4组GSH-Px含量显著高于对照组(P<0.05)(表2)。

3.1乳酸菌发酵饲料对蛋鸡杭氧化能力的影响

体外或动物试验也已证明，植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌具有清除活性氧的作用。等体外细胞试验发现，植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌具有较强的清除自由基的能力，且植物乳杆菌优于嗜酸乳杆菌。体外试验证明，从传统发酵饮料中分离的植物乳杆菌DMs清除自由基的作用更强。体外试验证明，嗜酸乳杆菌清除能力相对较强。通过体外试验发现，植物乳杆菌KM1具有较强的抗氧化能力。研究认为植物乳杆菌KM1通过改变磷酸苷油激酶。α-甘油磷酸氧化酶、丙酮酸氧化酶和NADH过氧化物酶的表达水平来缓解氧化应激。植物乳杆菌JLAU103中分离、纯化一种酸性胞外多糖(EPS )，体外试验发现其对自由基具有较强的清除能力。体外试验发现，植物乳杆菌KLDS 1.0386具有清除经自由基和脂质抗氧化能力。植物乳杆菌KLDS 1.0386显著降低了LPS对小鼠肝组织损伤、TNF-α和IL-6水平以及髓过氧化物酶(MPO)活性。报道，植物乳杆菌代谢产物能显著提高肉仔鸡血清中SOD和GSH-Px活性。本试验结果表明，给蛋鸡饲喂含5%、10%和15%植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌发酵饲料的混合日粮，可显著提高蛋鸡血浆SOD、GSH-Px和T-AOC活性，显著降低血浆MDA含量，反映了饲喂植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌发酵饲料能提高机体清除自由基的能力和降低脂肪氧化损伤，对细胞和组织具有显著的保护作用。可见，利用植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌发酵饲料饲喂蛋鸡是十分有益的。

3.2乳酸菌发酵饲料对蛋鸡禽流感和新城疫免疫杭体水平的影响

将植物乳杆菌或嗜酸乳杆菌添加饮水或饲料中，可提高家禽的免疫功能。报道，给肉鸡的饮水中加人植物乳杆菌可显著提高肉鸡血液IgG和新城疫免疫抗体水平。报道，给肉鸡的饮水中加人植物乳杆菌可显著提高肉鸡血液IgA水平。在饲料中添加植物乳杆菌，提高了肉鸡血液IgA、IgG、IFN-y、IL -2和IL-6水平。给雏鸡灌服植物乳杆菌液，可显著提高雏鸡血液中新城疫免疫抗体效价。用嗜酸乳杆菌培养液给雏鸡饮水，显著提高了血清IgG和新城疫疫苗免疫抗体水平。给肉鸡饲喂添加植物乳杆菌L-137的饲料，显著提高了肉鸡脾脏IL-12β、IFN-β和IFN-y的基因表达水平。本试验结果表明，在蛋鸡日粮中饲喂乳酸菌发酵饲料均能提高禽流感H9N1抗体水平，试验至30天，第2、4组极显著高于对照组，试验至60天，试验组极显著或显著高于对照组。在整个试验期内试验组新城疫抗体水平极显著或极显著高于对照组。可见，给蛋鸡饲喂植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌发酵饲料可提高蛋鸡疫苗免疫抗体水平，提高蛋鸡的抗病力，值得推广应用。

3.3乳酸菌发酵饲料对蛋鸡脏器指数的影响

本试验结果表明，用乳酸菌发酵饲料替换基础日粮，试验鸡脾脏指数呈现逐渐增高的趋势，15%乳酸菌发酵饲料+85%基础日粮组蛋鸡的脾脏指数显著高于对照组。在肉鸡饲料中添加植物乳杆菌，可显著提高脾脏指数。给肉鸡饮用植物乳杆菌菌液，脾脏指数也呈现明显的增加趋势。研究了副干酪乳杆菌KL1和植物乳杆菌亚种的作用，发现与自痢沙门氏菌感染组相比，益生菌治疗组和益生菌预防组农大3号矮种鸡的脾脏指数显著增加。在鸡饮水中添加0.3%的乳酸菌微生态制剂，与对照组鸡比较，脾脏指数提高了67.14%。在基础日粮中分别添加1.0%、2.0%的乳酸冻干菌菌粉，肉鸡脾脏指数显著高于对照组。显然，以植物乳杆菌为代表的乳酸菌具有提高脾脏体重比的作用，与其增强动物免疫功能的作用是一致的。本试验发现，饲喂乳酸菌发酵饲料，提高了蛋鸡禽流感和新城疫疫苗免疫抗体水平，与脾脏指数提高有明显的一致性。其原因可能是免疫器官发育是机体免疫功能的组织学基础。但是，乳酸菌对免疫器官发育的影响受乳酸菌种类和摄人量的影响。试验发现，三株乳酸菌培养物均能显著提高肉鸡脾脏指数，其中两株乳酸菌培养物显著提高胸腺指数，一株乳酸菌培养物显著提高法氏囊指数。报道，在饲料中添加1.0 x 108 CFU/g约氏乳杆菌，对育成期蛋鸡脾脏指数没有显著的影响。本试验发现，饲喂5%乳酸菌发酵饲料+95%基础日粮组、10%乳酸菌发酵饲料+90%基础日粮组，蛋鸡脾脏指数与对照组没有显著差异。可见，菌种、剂量选择是至关重要的。

本试验发现，用5%~15%乳酸菌发酵饲料替换基础日粮，蛋鸡肝脏指数显著低于基础日粮组，与已有报道不一致。在饲料中添加植物乳杆菌，对肉鸡肝脏指数没有显著影响。报道，在育成期蛋鸡饲料中添加1.0x108 CFU/g约氏乳杆菌，对肝脏指数没有显著的影响。可能与本试验用乳酸菌发酵饲料替换基础日粮，导致试验组饲料能量水平低于对照组有关。也可能与植物乳杆菌或嗜酸乳杆菌及其代谢产物影响了肝脏脂肪代谢有关。给大鼠灌胃1.05x109、2.10x109、4.20x109 cfu/(kg·d)的乳酸菌悬液，其肝脏TG显著低于肥胖组大鼠(阳性对照)，高剂量组大鼠的肝体比显著降低。关于乳酸菌影响动物脂肪代谢的菌株筛选、有效剂量、作用机制有待进一步研究。

蛋鸡饲粮中添加植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌发酵饲料，可提高蛋鸡抗氧化能力和免疫功能，以添加15%最佳。