搜索

饲粮不同添加量的凝结芽孢杆菌对仔猪生长性能及肠道健康的影响

2021-08-03 10:33:43      点击:

在我国饲料工业全面“禁抗”、养殖业逐步“减抗”的发展态势下,研发饲用微生态制剂、天然植物提取物等安全饲料添加剂及其应用关键技术,以保障畜禽合理的生产性能、减少养殖损失,成为当前我国畜牧科研工作者及企业从业人员的重点工作之一(Barba-Vidal,2018;Liu等,2018;葛长荣等,2019)。微生态制剂凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)2013年正式列入《饲料添加剂品种目录》(程志斌等,2017;夏涛等,2019),因其良好的安全性(Endres等,2009;Endres等,2011)、耐热性(赵树平等,2014;邹梅等,2017)、抑菌性(Midhun等,2018;Kawarizadeh等,2019)等优势,在仔猪饲料替抗应用领域得到了一定的认可与关注(Lan等,2017;程志斌等,2017;Pu等,2018;Wu等,2018)。

然而,本课题组分析以往的试验文献报道,前期发表综述(程志斌等,2017),指出了凝结芽孢杆菌在仔猪料应用中的两个尚待解决的问题:其一,与当前商业饲用抗生素相比,在保障合理的仔猪生产性能范围内,确定凝结芽孢杆菌的适合添加量;其二,参考抗生素的作用机理,揭示凝结芽孢杆菌保障断奶仔猪生长性能的可能机理。据此,本试验设计了抗生素组、基础饲粮组,对比研究不同添加量的凝结芽孢杆菌对仔猪生长性能的影响,并从部分肠道健康指标来探讨其可能的作用机理。

1材 料 与 方 法

1.1 凝结芽孢杆菌

课题组从云南省曲靖市富源县农村散养的地方品种猪“大河猪”肠道中,分离出一株产乳酸的芽孢杆菌,该菌株经过课题组系统的理化分析与16s RNA鉴定为凝结芽孢杆菌,命名凝结芽孢杆菌YNAU 3127,并用于本次动物试验。

1.2 试验动物与试验分组

挑选(26±1)日龄断奶、平均体重约7.5 kg的健康商品阉公猪(杜×长×大)30头,平均分成5个处理组,每个处理组6个重复,每个重复1头试验仔猪,代谢笼单笼饲养。试验处理组的分组:①处理组1:抗生素组(antibiotic group,AB),基础日粮中添加组合抗生素(吉他霉素50 g/t、土霉素50 g/t、金霉素75 g/t);②处理组2:基础饲粮组(antibiotic free group, ABF),即只饲喂基础日粮,且不添加任何抗生素及凝结芽孢杆菌;③处理组3:凝结芽孢杆菌组BC0.5(0.5×107 CFU/g Bacillus coagulans supplemented group,BC0.5),在基础日粮中添加0.5×107 CFU/g(全价配合饲料)的凝结芽孢杆菌;④处理组4:凝结芽孢杆菌组BC1.0,在基础日粮中添加1.0×107 CFU/g凝结芽孢杆菌;⑤处理组5:凝结芽孢杆菌组BC2.0,在基础日粮中添加2.0×107 CFU/g凝结芽孢杆菌。具体试验分组设计见表1。

1627958121606662.jpg

1.3 试验日粮

参照NRC(2012)猪营养需要标准,同时结合云南省猪饲料市场实际情况,配制玉米-豆粕-鱼粉型试验饲粮。试验基础日粮配方及营养水平见表2,颗粒饲料在云南快大多畜牧科技有限公司生产。

1627958185963912.jpg

1.4 饲养管理

试验期每天3次喂料,自由饮水,控制试验猪舍合理温度。试验周期为仔猪26~35日龄,共10 d。

1.5 取样及指标测定

试验第10 d,所有试验猪测定体重、采食量,用于平均日增重、平均日采食量、料肉比、腹泻指数等生长性能指标的分析。腹泻指数以笼为统计单元,计算公式如下:腹泻指数(%)=(腹泻猪只数×腹泻天数)÷(猪只数×饲养天数)×100。

随后,处死所有试验猪,取盲肠食糜、空肠及空肠黏膜,进行以下指标测定。

1.5.1 盲肠食糜微生物菌群

盲肠食糜样品取样后,在-20 ℃冰箱中保存。乳酸杆菌与大肠杆菌数量的检测在2个月内完成,检测方法参考课题组前期的报道(黄遵锡等,2017)。

1.5.2 空肠黏膜二胺氧化酶和麦芽糖酶活性

空肠冲洗干净食糜后,取20 cm空肠,用载玻片刮取空肠黏膜,并分成2份,放置于-20 ℃冰箱中保存。1个月内完成二胺氧化酶和麦芽糖酶活性的测定,二胺氧化酶的检测方法参考Pan等(2017)的报道,麦芽糖酶的检测方法参考程志斌等(2015)的报道。

1.5.3 空肠绒毛高度与隐窝深度

空肠绒毛高度与隐窝深度的测定参考Che等(2017)的方法进行,简单描述如下。空肠样品取出后,在甲醛固定液中固定,随后在二甲苯中漂洗,并用石蜡包埋。将包埋好的样品切割出4个5 μm 厚的切片,用苏木红-尹红染色,制成最终切片样品。切片样品在尼康双筒目镜(Warsaw公司,波兰)下,放大20倍,测定绒毛高度和隐窝深度。肠绒毛高度是从隐窝开口至绒毛顶端的距离,隐窝深度是基底层至隐窝开口的距离。每张切片至少连续观察测定20根绒毛的高度及其相应的隐窝深度,并计算平均值。

1.6 统计分析

除了仔猪腹泻指数使用卡方统计外,其他数据进行单因素方差分析和Duncan's法多重比较。统计软件使用SPSS17.0,P<0.05表示差异显著。

2结 果 与 分 析

2.1 凝结芽孢杆菌对断奶仔猪生长性能的影响(见表3)

由表3可知,与抗生素组(AB)相比,饲喂基础饲粮组(ABF)仔猪的末重、平均日增重显著下降(P<0.05),而料重比、腹泻指数显著上升(P<0.05)。与ABF组相比,饲粮添加凝结芽孢杆菌的BC1.0组和BC2.0组仔猪的末重、平均日增重显著增加(P<0.05),腹泻指数显著下降(P


1627958249554851.jpg

2.2 凝结芽孢杆菌对仔猪盲肠食糜乳酸杆菌和大肠杆菌菌群数量的影响(见图1)

由图1可见,与AB组相比,ABF组仔猪盲肠食糜的乳酸杆菌数量显著降低(P<0.05),大肠杆菌数量显著上升(P<0.05)。与ABF组相比,BC1.0组和BC2.0组仔猪盲肠食糜的乳酸杆菌数量显著增加(P<0.05),大肠杆菌数量显著减少(P

1627958305826726.jpg

2.3 凝结芽孢杆菌对仔猪空肠黏膜二胺氧化酶、麦芽糖酶活性的影响(见图2)

由图2可见,与AB组相比,ABF组仔猪空肠黏膜的麦芽糖酶活性显著降低(P<0.05)。与ABF组相比,BC1.0组和BC2.0组仔猪空肠黏膜的麦芽糖酶活性显著增加(P


1627958372246916.jpg

2.4 凝结芽孢杆菌对仔猪空肠绒毛高度、隐窝深度的影响(见图3)

由图3可见,与AB组相比,ABF组仔猪空肠的绒毛高度显著下降(P<0.05)。与ABF组相比,BC0.5组、BC1.0组和BC2.0组仔猪空肠绒毛高度显著增加(P

1627958417131849.jpg

3讨 论

据课题组前期发表的综述文献(程志斌等,2017)显示,现有关于凝结芽孢杆菌改善断奶仔猪生长性能的绝大多数试验报道(周映华等,2012;黄海强,2014;Wu等,2018;张越等,2018),其参照的对照组是无任何饲料添加剂的基础饲粮组(ABF),这显然很容易得出凝结芽孢杆菌添加的正效应,包括本课题组前期报道(余冬友等,2017)和本试验数据(见表3)均验证了这一观点。因此,本研究才进一步设计了抗生素组(AB组),所饲喂的抗生素(吉他霉素50 g/t、土霉素50 g/t、金霉素75 g/t)是近3年来我国饲料企业最常用的仔猪饲用抗生素方案(黄遵锡等,2017)。本研究目的在于评估凝结芽孢杆菌替抗的适合添加量及作用效果。

3.1 凝结芽孢杆菌对断奶仔猪生长性能的影响

表3结果显示:与ABF组相比,3个补充凝结芽孢杆菌组的仔猪生长性能均有较大改善,尤其是BC1.0组和BC2.0组仔猪生长性能更优异,这与课题组前期报道(余冬友等,2017)及张越等(2018)的结论基本一致。而且,本试验首次发现,补充(1.0~2.0)×107 CFU/g凝结芽孢杆菌的BC1.0组和BC2.0组仔猪各项生长性能指标,与抗生素组仔猪差异不显著。以上结果表明:本试验条件下,日粮补充大于1.0×107 CFU/g高添加量的凝结芽孢杆菌,能够使断奶仔猪获得与饲用抗生素较为接近的生长性能;而0.5×107 CFU/g低添加量的凝结芽孢杆菌饲喂效果,略低于抗生素效果。这些结果提示,凝结芽孢杆菌改善断奶仔猪生长性能的作用有明显的剂量效应,其机理可能与维持肠道健康的程度有关(Jäger等,2018;Pluske等,2018)。据此,本试验进一步分析了以下肠道健康的部分指标。

3.2 凝结芽孢杆菌对断奶仔猪盲肠食糜菌群的影响

肠道菌群平衡是肠道健康的基础(Gresse等,2017;Li等,2017),因此本研究首先分析了凝结芽孢杆菌对仔猪盲肠食糜乳酸杆菌和大肠杆菌菌群数量的影响(图1)。结果显示:与AB组相比,ABF组仔猪盲肠食糜的乳酸杆菌数量显著降低、大肠杆菌数量显著上升,这是抗生素抑菌改善肠道健康、提高断奶仔猪生产性能的重要机理之一(Li等,2017)。随着饲粮中凝结芽孢杆菌添加量的增加,仔猪盲肠食糜的乳酸杆菌数量逐步增加、大肠杆菌数量显著减少,这一结果与张越等(2018)的结论基本一致。进一步分析,本试验首次发现:添加2.0×107 CFU/g凝结芽孢杆菌的仔猪盲大肠杆菌数量与抗生素组差异不显著。这一结果表明,本试验创新筛选并用于动物试验的凝结芽孢杆菌,对革兰氏阴性大肠杆菌的抑制效果较好,具有显著的体内抑菌特性。以往更多的试验报道均显示(Midhun等,2018;Kawarizadeh等,2019):凝结芽孢杆菌在体外实验室培养条件下,对有害大肠杆菌具有显著的抑制作用;但这一体外抑菌效果并未在动物饲喂试验(体内)中与抗生素抑菌效果进行比较验证,而本研究首次弥补了这一空白。

3.3 凝结芽孢杆菌对断奶仔猪空肠黏膜麦芽糖酶、二胺氧化酶活性的影响

麦芽糖酶是仔猪肠上皮细胞合成并分泌进入肠腔,用于分解食糜中二糖、三糖的关键酶之一(程志斌等,2015;Xiong等,2019)。由于仔猪肠上皮细胞只能以各种单糖的形式摄入饲料碳水化合物,因此麦芽糖酶对仔猪碳水化合物的营养有关键调控作用,所以麦芽糖酶经常用于反映幼龄仔猪肠道的发育(程志斌等,2015)和(或)损伤程度(蒲俊宁等,2018)。图2结果显示:日粮补充(1.0~2.0)×107 CFU/g凝结芽孢杆菌的仔猪空肠黏膜的麦芽糖酶活性,与抗生素组差异不显著,且均高于饲喂基础饲粮的仔猪。这一结果表明:凝结芽孢杆菌与抗生素均有利于维护肠道机械屏障的完整性,有助于保障断奶仔猪的肠道健康。众所周知,肠道大肠杆菌、尤其是致病大肠杆菌所分泌的毒素、崩解的脂多糖等多种有害物质,极易破坏肠黏膜上皮细胞,造成肠上皮渗透性增加,肠道机械屏障完整性受损(Gresse等,2017;Luise等,2019)。结合图1的肠道菌群数据,以上结果证明:日粮补充凝结芽孢杆菌能够通过抑制肠道有害菌及其可能的有害代谢产物,来减少对断奶仔猪肠道上皮细胞的损伤,且这一作用有明显的剂量效应。

此外,二胺氧化酶活性也经常用于评估肠道机械屏障的完整性,即判断肠黏膜损伤程度(Pan等,2017;Wu等,2018),因为二胺氧化酶与上皮细胞内的核酸和蛋白合成密切相关,是上皮细胞损伤修复与更新的关键调控酶之一(Wu等,2018)。然而,本试验结果显示(见图2):空肠黏膜二胺氧化酶活性,所有处理组之间差异不显著。我们推测本试验条件下,空肠黏膜二胺氧化酶活性差异不显著的可能原因包括:其一,在本实验室饲养试验环境卫生控制很好的情况下,所有试验仔猪肠黏膜的损伤程度在可接受的范围内,且二胺氧化酶的活性数值较小,这就造成活性数据统计上的差异不显著。其二,就反映肠黏膜正常生理和(或)损伤程度而言,可能二胺氧化酶不如麦芽糖酶敏感,因为麦芽糖酶的活性数值较大。

3.4 凝结芽孢杆菌对断奶仔猪空肠绒毛形态的影响

仔猪肠黏膜上皮细胞来源于隐窝处干细胞的分裂、增殖、增生和逐步向绒毛顶端的迁移,细胞在迁移过程中逐步完成功能的成熟,这些功能包括正常的消化、吸收和分泌等功能(Ji等,2019),由此绒毛高度显示肠上皮细胞的功能状况,而隐窝深度则更加反映上皮细胞的增殖和损失更替状况(Chen等,2019)。因此,测定肠绒毛高度、隐窝深度是评估幼龄仔猪肠道发育和功能成熟(程志斌等,2015;Ji等,2019)以及损伤修复(Che等,2017;Pan等,2017)的重要标志。图3结果显示:抗生素组仔猪绒毛高度显著大于基础饲粮组,也验证了抗生素组仔猪肠道营养消化与吸收功能优于基础饲粮组(Li等,2017),这与表3抗生素组仔猪生长性能优于基础饲粮组的结果相符。进一步分析,补充凝结芽孢杆菌的3个处理组仔猪绒毛高度与抗生素组差异不显著,结合图1肠道菌群的数据,充分证明:凝结芽孢杆菌具有减少肠道有害菌对肠黏膜的损伤,维持断奶仔猪肠道健康的重要作用(J?ger等,2018),且这一作用效果与抗生素相近;这是本研究高添加量凝结芽孢杆菌改善断奶仔猪生长性能的重要作用机理。此外,图3发现所有处理组之间的空肠隐窝深度差异不显著,表明本试验条件下所有试验仔猪肠黏膜可能只发生轻微损伤,这也与图2反映肠道损伤程度的二胺氧化酶活性结果相符。

4结 论

正常养殖环境条件下,断奶仔猪无抗日粮补充凝结芽孢杆菌,具有显著提高生长性能的作用效果,且这一效果有显著的剂量效应。实际饲料配方应用中,添加(1.0~2.0)×107 CFU/g的凝结芽孢杆菌才能获得与商业抗生素相近的饲喂效果,其作用机理与足量添加的凝结芽孢杆菌才能有效保护肠道健康有关。

1627959212520082.jpg


本产品由多种特异性乳酸菌、产酶芽孢杆菌、布拉氏酵母、产朊假丝酵母、酿酒酵母、双歧杆菌、丁酸梭菌与部分中草药发酵而成的高活性发酵饲料产品。

【主要成分】

高浓度复合乳酸菌、芽孢杆菌、酵母菌、双歧杆菌、丁酸梭菌、淀粉酶、复合酶制剂、活性小肽、酸化剂、多维、复合氨基酸等。

【主要载体】

豆粕、鱼粉、玉米粉、玉米胚芽、小麦次粉及核心原料,辅料部分为中草药(主要有黄芪、大青叶、香附、白术、枳壳、槟榔、茯苓、金银花、甘草等18味,20211月份再次升级后本品每袋不少于3公斤中草药)

【规格指标】

粗蛋白≥18%;粗脂肪≥5%;粗灰分≤6%;有效活菌数不同储存时间在20-200亿CUF/g。包装规格为20公斤/袋。本产品复合饲料卫生标准。  

打开多功能生物发酵活菌肽香气四溢并可以长时间保持,多功能生物发酵活菌肽包装内物料,颜色会随着时间长短而有所变化,样品打开后由于接触空气在一周左右可能会霉变,请及时饲喂或者丢弃。产品打开包装后要及时密封,并请在7-15天内喂完,以免接触空气后产生霉变影响质量。

【产品功效】

1.维护肠道粘膜健康,促进亚健康动物群体快速改善,提高畜禽对营养物质的吸收,对比提高日增重。

2.所选的有益菌的代谢产物可迅速弥补消化道中内源酶的不足,维护肠道微生态平衡,降低肠道负担,利于营养的吸收,防止畜禽营养性肠道健康问题的发生。

3.预防幼小畜禽由于更换饲料、抓捕、运输等刺激性因素造成的应激反应。

4.提高钙、磷、铁等元素与有机微量元素的吸收,增加畜禽排卵数量,提高畜禽的产仔(产蛋)数量。

5.提高饲料消化利用率,促进饲料中碳水化合物的分解,促进饲料中非蛋白氨转化为高品质蛋白质,提高饲料利用率,提高增重和降低料肉比。

6.提高瘦肉率,降低背膘厚度,使臀肌、腿肌饱满发达,形体丰满结实,快速清除药残,改善酮体品质和风味,提高屠宰瘦肉率。

7.运用本品后轻度霉变饲料可以不再需要添加脱霉剂产品,本品的活性微生物代谢产生霉菌抑制复合物,有效抑制霉菌的生长,降低霉菌毒素的产生,降解部分霉菌毒素,达到解毒效果。较重霉变饲料建议不要使用或者另外添加脱霉剂。

8.改善养殖环境,快速降低养殖环境臭味和氨气;减少动物粪便排泄量,粪便自然成形并减少粪便含水量,加快动物粪便自然发酵速度。


1565512781186327.jpg

1596114655527655.jpg

客户反馈使用后蛋鸡增产明显

【用法用量】

猪各阶段、牛羊、鸡鸭鹅家禽与特种养殖上均可使用。混合饲料中饲喂,也可以单独少量直接补充洒在料槽中饲喂。由于本品1公斤相当于约1.5~2公斤全价饲料能量,在每吨全价饲料中添加本品1包(20公斤)的情况下,可以减少全价饲料40公斤(1包)的使用量。

1.养猪上的运用:日常中每吨饲料使用本品1包(20公斤),初次使用与在周围疫情严重、泌乳期、出栏前1个月可以增加2-4倍的使用量。仔猪、肉猪、母猪各阶段都可以使用,用药和免疫期间不需要停止无副作用。可以与部分全价饲料简单混合后进入自动供料系统中运用。

2.家禽上的运用:每吨饲料使用本品1包(20公斤),初次使用与在周围疫情严重、蛋禽、出栏前1个月可以增加2-3倍的使用量。

3.牛羊上的运用:每1吨精饲料中使用本品3-5包。

4.特种动物养殖上的运用:每1吨饲料中添加本品2包,出栏前一个月增加一倍的使用量;部分昆虫养殖上运用本品也有恢复肠道健康和解决一些疑难问题。

1565513523820357.jpg

5、直接撒喂方法:如果混料不方便等,可以将本产品单独直接洒到畜禽养殖区投喂,撒喂比例按照1吨饲料运用本品1包的使用量饲养区域,尽量撒散开确保每只畜禽都能够吃到。由于本产品非常香醇可口,畜禽都会抢吃干净。每天撒喂1次即可。

6、饮水中运用本产品的方法:规模养殖场自动饮水系统的操作需要将本产品1包放入网纱袋内,浸入到1吨水中来回揉搓3分钟以上,大部分本产品会融入水中,剩余不溶解的残渣直接投喂或者拌料。每吨饮水中添加1公斤红糖并且静止半小时以上再给动物饮水效果更好;小规模养殖场或者不是自动饮水的养殖场,将本产品1包直接倒入到1吨饮水中后搅动一下给动物饮用即可(加入1公斤红糖静止半小时以上效果更好)。本产品益生菌数量多,且中草药也会大部分会释放出来,因此饮水也是能够达到很不错的效果。

【注意事项】

1.阴凉干燥处严格密封保存,开启后要求在7-15天内喂完,用后及时封口确保密封。

2.与干料混合后最好在7天内喂完,在饮水中运用后要求在2天内用完。

3.免疫期间、大剂量运用抗生素时可能会降低本品中益生菌的效果,但无副作用,不需要停止使用。初次使用后几天猪群采食量会稍有下降,这是因为运用后消化吸收率提高造成的,不会影响生长等;部分猪可能会出现拉稀,这是因为肠道紊乱导致也正好需要益生菌进行调理,一般几天就会恢复正常;部分蛋禽初次使用产蛋率稍有下降也是因为肠道紊乱导致一般很快就能够恢复。

1565513852900138.jpg

【规格】20公斤/袋(市场售价一般为160-200元/袋),也可以为饲料厂、饲料添加剂厂、大型养殖公司定制不同规格和专用包装、配方等。

广西助农畜牧科技有限公司提供全方位支撑

2020年已全面禁抗,我们之前经常在饲料中添加的抗生素进行促生长行为将是违法,否则面临巨额罚单。如何既能够促进动物生长又能够形成无抗养殖呢?其实中草药在促进畜禽养殖健康和生长、改善肉蛋奶品质大有可为,特别是将中草药发酵后效果提升4-28倍等好处,这个实施方案比你想象中效果更好,运用的没有不被效果折服的,值得尝试验证

我们的技术仅需在出栏前半个月左右运用益生菌+酶制剂+中草药相关的无违禁安全产品,肉质改善非常显著,且可以批量化生产。

目前我们已经有了成熟的技术、产品和运用方案,且有大量成功案例,可以在短时间、批量化、安全无违禁地为您的养殖场生产出高品质的家畜、家禽、水产产品。

规模养殖场养殖公司我们提供产品样品、验证效果和通过检测后您再放心地规模化运用。

微信公众号:gxzn-99

微信号:gxzn07713815862

电话:0771-2204816,3800156,3815862

网站:www.fjc001.com, www.zn99.com

淘宝店:gxzn99.taobao.com

微店:weidian.com/?userid=1353707843 

产品购买微信转账请添加18076549930或15578100088为好友(还可以咨询技术与业务问题)

相关链接——农业农村部鼓励企业和研发机构加快生物饲料、酶制剂、益生菌、植物提取物等抗生素替代产品开发,推动全行业抗生素减量替代,确保畜禽产品质量安全


加微信好友咨询
技术QQ客服
点击这里给我发消息
淘宝旺旺客服
微信公众号和客服